Цоликлоны для определения группы крови

Результаты реакции

Таблица результатов типирования крови с помощью цоликлонов.

Групповая принадлежность	Моноклональный реагент
Анти-A	Анти-B	Анти-AB
0(I)	—	—	—
A(II)	+	—	+
B(III)	—	+	+
AB(IV)	+	+	+

«+» — положительный результат реакции; «-» — отсутствие агглютинации.

• Отрицательный результат реакции во всех трех лунках свидетельствует об отсутствии агглютиногенов. Группа: 0(I).
• Агглютинация с Анти-A и Анти-AB говорит о наличии агглютиногена A. Групповая принадлежность: A(II).
• Реакция в лунках с Анти-B и Анти-AB указывает на наличие антигена B. Групповая принадлежность: B(III).
• Реакция во всех трех лунках говорит о присутствии обоих антигенов. Группа: AB(IV).

смешивание анализируемых проб с цоликлонами
инкубация планшета после перемешивания
результат реакции
визуальная оценка результатов реакции
регистрация результатов анализа

Методика проведения исследования с помощью цоликлонов требует обязательного подтверждения результатов реакции выявлением агглютининов α и β стандартными эритроцитами.

Алгоритм определения резус-фактора представлен в соответствующей статье.

Статья носит информационный характер. Изложенная информация не избавляет сотрудников ЛПУ и специалистов Службы крови от использования в повседневной практике методических рекомендаций, содержащихся в следующих документах:

• Постановление Правительства Российской Федерации от 04.07.2020 № 986 «Об отмене отдельных актов федеральных органов исполнительной власти, признании не действующими на территории Российской Федерации отдельных актов и иных документов Министерства здравоохранения РСФСР и признании не действующими на территории Российской Федерации отдельных актов и иных документов Министерства здравоохранения СССР, содержащих обязательные требования, соблюдение которых оценивается при осуществлении государственного контроля за обеспечением безопасности донорской крови и ее компонентов»;
• Постановление Правительства Российской Федерации от 22.06.2019 № 797 «Об утверждении Правил заготовки, хранения, транспортировки и клинического использования донорской крови и ее компонентов и о признании утратившими силу некоторых актов Правительства Российской Федерации»;
• Приказ Минздрава России от 20.10.2020 г. № 1134н «Об утверждении порядка медицинского обследования реципиента, проведения проб на индивидуальную совместимость, включая биологическую пробу, при трансфузии донорской крови и (или) ее компонентов»;
• Приказ Минздрава России от 28.10.2020 г. № 1166н «Об утверждении порядка прохождения донорами медицинского обследования и перечня медицинских противопоказаний (временных и постоянных) для сдачи крови и (или) ее компонентов и сроков отвода, которому подлежит лицо при наличии временных медицинских показаний, от донорства крови и (или) ее компонентов».

Список литературы

• Рагимов, А.А. Трансфузионная иммунология/А.А. Рагимов, Н.Г. Дашкова. — М.: Медицинское информационное агентство, 2004. — 279 с.
• Шевченко, Ю.Л. Безопасное переливание крови/Ю.Л. Шевченко, Е.Б. Жибурт. — СПб.: Питер, 2000. — 308 с.
• Минеева, Н.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии — СПб.: Издательско-полиграфический комплекс «Гангут», 2020. — 360 с.

Патенты

Расшифровка результатов

Спустя несколько минут после соединения реагентов можно наблюдать результаты. Полное смешивание жидкостей говорит об отсутствии реакции, а агглютинация проявляется появлением красных сгустков в прозрачном растворе. Это эритроциты, которые склеиваются между собой при контакте с несовместимыми моноклональными антителами. Далее можно расшифровать результаты по простому алгоритму:

• 1 группа (0) — агглютинация отсутствует в обеих каплях, поскольку на эритроцитах отсутствуют агглютиногены;
• 2 группа (А) — реакция наблюдается в первой капле с цоликлоном анти-А;
• 3 группа (В) — во второй капле происходит склеивание эритроцитов при контакте с реагентом анти-В;
• 4 группа (АВ) — появление красного осадка в обеих каплях.

Четвертая группа крови считается самой редкой, поэтому при появлении агглютинации в обеих лунках анализ проводится повторно. Кроме того, кровь необходимо добавить в обычный физиологический раствор, чтобы исключить вероятность опасных заболеваний. У здорового человека она никак не прореагирует с физраствором, а эритроциты не будут склеиваться.

Алгоритм определения в планшете

1. Внесите в лунку планшета 50 – 100 мкл реагента.
2. Добавьте 50 мкл 5 % взвеси эритроцитов в растворе NaCl.
3. Перемешайте пипетированием.
4. Инкубируйте при температуре 18 – 25 °С один час.
5. Проведите визуальную оценку осадка эритроцитов на дне лунки. В случае положительного результата RhD-типирования агглютинаты с неровными четко очерченными краями равномерно выстилают дно. При отсутствии антигена D наблюдается осадок в виде точки.

отбор образца крови

фенотипирование проб по наиболее клинически значимым антигенам эритроцитов

визуальная оценка при исследовании проб на наличие клинически значимых антигенов эритроцитов

Болезни сердца и сосудов общая информация на News4Health.ru

Кардиология — область медицины, изучающая жизненно важную систему организма человека – сердечно-сосудистую: особенности строения и функции сердца и сосудов, причины и механизмы возникновения патологии; разрабатывает и совершенствует методы диагностики, предупреждения и лечения сердечно-сосудистых заболеваний

Значительное внимание в кардиологии уделяется вопросам реабилитации больных с сердечно-сосудистой патологией. К сожалению, заболевания сердца и сосудов имеют все большую тенденцию к поражению молодых людей и представляют одну из важнейших проблем современного здравоохранения

Практическая кардиология развивается в двух направлениях: терапевтическая кардиология и кардиохирургия

Терапевтическая кардиология применяет консервативные методы (медикаментозные препараты, санаторное лечение) для лечения сердечно-сосудистых заболеваний: брадикардии, тахикардии, аритмии, экстрасистолии, вегето-сосудистой дистонии, атеросклероза сосудов, артериальной гипертензии, стенокардии, инфаркта миокарда, ишемической болезни сердца, сердечной недостаточности, миокардита, перикардита, эндокардита

Практическая кардиология развивается в двух направлениях: терапевтическая кардиология и кардиохирургия. Терапевтическая кардиология применяет консервативные методы (медикаментозные препараты, санаторное лечение) для лечения сердечно-сосудистых заболеваний: брадикардии, тахикардии, аритмии, экстрасистолии, вегето-сосудистой дистонии, атеросклероза сосудов, артериальной гипертензии, стенокардии, инфаркта миокарда, ишемической болезни сердца, сердечной недостаточности, миокардита, перикардита, эндокардита.

Хирургическая кардиология оперативным путем устраняет врожденные и приобретенные пороки сердца и другие поражения сердца и сосудов, осуществляет протезирование клапанов и сосудов сердца.

Сердечно-сосудистые заболевания в настоящее время считаются самой распространенной причиной инвалидизации и ранней смертности населения в экономически благополучных странах Запада. По статистике, процент смертности при сердечно-сосудистых заболеваниях составляет 40-60% ежегодно от общего количества смертей.

Основными симптомами, позволяющими заподозрить развитие сердечно-сосудистых заболеваний, являются боли, возникающие за грудиной, и отдающие в левое плечо или лопатку, одышка, стойко повышенное артериальное давление (АД свыше 140/90 мм рт.ст.), тахикардия (частота сердечных сокращений более 100 ударов в мин.) или брадикардия (пульс менее 50 ударов в мин.), перебои в сердечном ритме, отеки. При появлении первых признаков заболеваний сердца и сосудов, во избежание развития стойких нарушений и осложнений, необходимо сразу же обращаться к врачу-кардиологу. В начальном периоде развития болезни восстановление функций достигается легче и меньшими дозами препаратов.

В настоящее время кардиология вышла на новый уровень по оснащенности самой современной аппаратурой для быстрой и ранней диагностики и своевременного лечения сердечно-сосудистой патологии. Основными диагностическими методами в кардиологии являются: фонокардиография, электрокардиография (ЭКГ), эхокардиография (УЗИ сердца), суточное ЭКГ- мониторирование. Они позволяют оценить сократительную функцию и состояние сердечной мышцы, полостей, клапанов и сосудов сердца. Несколько последних десятилетий активно развиваются новые методы обследования пациентов с кардиопатологией: зондирование полостей сердца и ангиокардиография, позволяющие проводить диагностику и планирование операций на сердце и коронарных сосудах.

Современные технологии и методы лечения сердечной патологии позволяют справиться с болезнями сердца, еще вчера считавшимися неизлечимыми. При помощи пересадки сердца сегодня кардиология спасает жизнь многим отчаявшимся пациентам.

Главным направлением в комплексе профилактических мер предупреждения болезней сердца являются оптимальные физические нагрузки, отказ от вредных привычек, исключение нервных перегрузок и стрессов, здоровое питание и полноценный отдых.

Определение групп крови стандартными сыворотками

В основе определения групп крови лежит реакция агглютинации, то есть слипания. Комки образуются, если в пробе имеются одновременно агглютиноген А и агглютинин альфа или агглютиноген В и агглютинин бета или же и то, и то одновременно. Агглютиногены содержатся в эритроцитах, а агглютинины являются компонентами плазмы крови.

В соответствие с этими признаками выделяют четыре группы крови по системе АВ0:
— I (0) – не содержит агглютиногенов, только агглютинины;
— II (A) – агглютинин b, агглютиноген А;
— III (B) – агглютинин a, агглютиноген B;
— IV (AB) – содержит только агглютиногены.

Одним из методов установления группы крови является определение групп крови по стандартным сывороткам. Стандартные сыворотки содержат в себе заведомо известные агглютинины: групп I, II и III

Обратите внимание, на фотографию ниже, возможна она будет вам полезна для лучшего восприятия текста

Протокол процедуры. Алгоритм.
Есть три сектора. Они могут быть в пределах одной тарелки, а могут быть специальными лунками. Секторы подписываются I, II и III, в каждый наносят соответствующую сыворотку.
У пациента выдавливают каплю крови, предварительно протерев палец спиртом. И переносят по капле стеклянной палочки в сектора с сыворотками. Затем перемешивают кровь с сывороткой до розового цвета и засекают время. Реакция проходит в течение пяти минут. Необходимо помнить, что при работе с каждой следующей сывороткой палочка меняется, чтобы не допустить искажения результатов из-за смешения сывороток. По прошествии указанного времени в лунки добавляют изотонический раствор NaCl и перемешивают.

Положительный результат реакции выглядит как красные зёрна, образованные слипшимися эритроцитами, при отрицательном — смесь сохраняет равномерную розовую окраску. Реакция протекает в течение 3-4 минут.

Анализ результатов
Дальнейшее определение групп крови – это элементарная комбинаторика. Если результат в трёх лунках отрицательный, то это группа 0, если прошла реакция только с II и I сыворотками, то группа A, только с I и III – B, а если с обеими – то AB. Все прочие комбинации – являются артефактом и указывают на неверное проведение процедуры анализа.
У ошибок могут быть разные причины. Самые частые это – использование слабых сывороток, у которых закончился срок годности; проведение анализа со слишком большой каплей крови пациента – она должна быть на порядок меньше, чем количество сыворотки, неспецифическая холодовая агглютинация при температуре среды, не соответствующей нормальной и слишком долгое время проведения реакции. Во время подсыхания на периферии смеси образуется зернистость, которая не должна учитываться при оценке группы крови.

Для наглядности, посмотрите это видео.

Определение резус-фактора

Для определения резус-фактора понадобится цоликлон анти- D. Он представлен бесцветной жидкостью и также продается в небольших флаконах с дозатором. Чтобы провести реакцию, достаточно одной дополнительной капли крови, которую помещают на планшете отдельно. Процедура проводится по следующей схеме:

1. нанести каплю цоликлона анти- D объемом 0,1 мл на стекло;
2. рядом добавить каплю крови, объем которой составляет 0,01 мл;
3. стеклянной палочкой соединить две жидкости и аккуратно шевелить стекло, чтобы кровь перемешивалась и реагентом;
4. спустя 3 минуты зафиксировать результат.

Первые результаты могут просматриваться через 15 секунд, но для установления окончательного результата важно подождать 3 минуты. Наличие результата, то есть появление реакции агглютинации, говорит о том, что резус-фактор положительный, его отсутствие свидетельствует об отрицательном резусе

СПРАВКА! Агглютинация выражается появлением красных хлопьев, состоящих из эритроцитов, которые можно увидеть невооруженным глазом, без специальных условий и оборудования.

Расшифровка анализов происходит по таблице, положительным результатом считается агглютинация эритроцитов

Оказание помощи врачу при наложении лейкопластырного скелетного вытяжения и вытяжения с помощью петли Глиссона

1. Уложить пациента на горизонтальную поверхность кровати с системой блоков и грузом в изголовье

1. Закрепить петлю Глиссона на голове либо из лейкопластыря сформировать петлю в основании черепа так, чтобы она фиксировалась у основания черепа (под подбородком и под большими затылочными буграми)

1. Прикрепить груз весом 6 кг (вес груза зависит от вида повреждения и определяется врачом)

35. Применение эластичных бинтов и чулок на нижние конечности

Эластичный бинт

1. Накладывать утром для предупреждения кровенаполнения и растяжения вен

2. Придать ноге возвышенное положение под углом 45 град.

3. Первые туры сделать у основания пальцев

4. Далее по спирали бинтовать до паховой складки

5. Туры должны оказывать умеренное давление на мягкие ткани; не должны вызывать неприятные ощущения; пальцы на стопе должны быть розовыми

36. Применение съемного бандажа, корсета

1. Предназначением бандажа, корсета является фиксация части туловища в функциональном состоянии, предупреждение осложнений, связанных с анатомическими дефектами тела, приводящими в отсутствии бандажа или корсета к более грубым анатомическим и функциональным расстройствам

1. Бандаж (корсет) должен содержаться в чистоте

1. Пациент должен принять горизонтальное положение перед надеванием бандажа (корсета)

1. При надевании не защемлять кожу; не допускать болезненных ощущений

Пуговицы и петли должны располагаться на лицевой стороне бандажа; лямки не должны «впиваться» в мягкие ткани.

1. Пребывание в бандаже (корсете) не должно приводить к нарушениям дыхания и сердечной деятельности

1. Непригодная кровь к переливанию, если:

— нарушены сроки и условия хранения крови

— флакон с кровью не имеет герметичности

— верхний слой во флаконе с кровью розовый (гемолиз эритроцитов)

— имеются капли жира, пленки, сгустки

— нечеткая граница между слоями крови во флаконе

1. Хранится кровь в холодильнике при температуре 4 град; транспортировка в специальных контейнерах, нивелирующих изменяющийся температурный режим окружающей среды

38. Составление наборов и определение групповой принадлежности и резус-фактора крови

Определение группы крови с помощью цоликлонов анти-А и анти-В

1. Приготовить тарелку, цоликлоны, стеклянные палочки, часы, исследуемую кровь

1. Разделить тарелку полосой фломастера на 2 части

1. Подписать

1. Нанести на тарелку по одной капле цоликлона анти-А и анти-В

1. Нанести на тарелку по одной капле крови (рядом с каплей цоликлона), каждая из которых в 10 раз меньше капли цоликлона

1. Разными концами стеклянных палочек перемешать

1. Покачивать в течение 2,5 минут

1. Читать результаты реакции:

агглютинации нет – 1 группа крови

агглютинация в анти-А — 2 группа крови

агглютинация в анти-В — 3 группа крови

агглютинация в обеих каплях – 4 группа крови

Определение резус-фактора

1. Приготовить пробирки, пипетки, физраствор (раствор хлорида натрия 0,9 %), универсальный реагент-антирезус, исследуемую кровь

1. Нанести на стенку пробирки каплю универсального реагента-антирезуса и каплю крови, равных по размеру

1. Покачивать 3 минуты

1. Добавить 3 мл. физраствора

1. Перевернуть, не встряхивая

1. Читать результаты реакции:

Наличие агглютинации – исследуемая кровь резус-положительная

Отсутствие агглютинации – исследуемая кровь резус-отрицательная

StudFiles.ru

I Коагулометрический вариант

1. В кювету коагулометра внести 0,1 мл. исследуемой плазмы и прогреть её при 37о С в течение 1 минуты
2. В кювету добавить 0,1 мл АПТВ-реагента, имеющего комнатную температуру
3. Через 3 минуты добавить 0,1мл раствора хлорида кальция (прогретого до 37о С), и зарегистрировать время свёртывания

1. В пробирку внести 0,1 мл исследуемой плазмы, добавить в ту же пробирку 0,1 АПТВ-реагента.
2. Пробирку встряхнуть, поместить её в термостат с прозрачными стенками
3. Через 3 минуты к смеси добавить 0,1мл раствора хлорида кальция (прогретого до 37о С) и включить секундомер.
4. Каждые 10 – 15 секунд пробирку необходимо доставать из термостата, наклонять в почти горизонтальное положение и наблюдать образование сгустка. Как только сгусток образуется, надо без промедления, выключить секундомер (этот пункт следует проделывать достаточно быстро; палец одной руки должен находиться на кнопке секундомера, а другой рукой надо доставать пробирку).

Расшифровка результатов

Проходит 5 минут, и можно оценивать результаты анализа. В больших каплях сыворотки наступает просветление, в одних образуются мелкие хлопья (реакция агглютинации), в других их нет. Здесь возможны варианты:

• если агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками III и II групп (+ контрольные 1 и 1V) — это первая группа;
• если свертывание отмечается во всех, кроме II — это указывает на вторую группу;
• при отсутствии агглютинации только с III сывороткой — устанавливается третья группа крови;
• если свертываемость отмечается во всех пробах, включая 1V-контрольную — группа четвертая.

Когда сыворотки расположены в правильном порядке, на тарелке проставлены подписи, то ориентироваться легко: где нет агглютинации, такая и группа.

Бывают случаи, когда склеивание видно неясно. Тогда анализ переделывают, мелкую агглютинацию смотрят под микроскопом.

Советы для домашнего определения

Подобные советы дают люди, которые «живут» в интернете и собирают любую информацию без разбора. Порой переиначивают ее на свой лад.

Действительно, имеется теория питания в зависимости от типа крови и проведены попытки связать с ней характер личности. Но это разрабатывалось для подбора наиболее подходящего рациона, предотвращения болезней. О связи типа личности с номером крови даже психологи перестали говорить.

Тем более, нельзя судить по любимым блюдам или наклонности к лидерству о своей группе.

В домашних условиях что-либо узнать лучше из полноценных статей, консультаций специалистов. Возможно, имеются медицинские документы (амбулаторная карта, выписки из стационара), в которых есть сведения о вашей крови.

По желанию доноров и пациентов стационаров в паспорт можно проставить печать с указанием этих сведений.

Подобные нашивки применяются на армейской форме

Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»

Метод позволяет определить группу и резус фактор в лаборатории и полевых условиях. В состав набора входит карточка с лунками. На дно лунок уже нанесены высушенные реагенты. Здесь, кроме «анти-А», «анти-В» и «анти-АВ» используется «анти-D», который дает результат резус-фактора.

Можно использовать кровь в любом виде, подойдет соединение с консервантом и взятая из пальца.

Перед исследованием на карточке записывается фамилия пациента, в каждую лунку вносится капля воды для растворения ингредиентов. Затем отдельными палочками в лунки с реактивами добавляют кровь и слегка перемешивают. Окончательный результат «читают» спустя три минуты.

Группа крови всегда перепроверяется при необходимости переливания. Одновременно контролируют групповую и индивидуальную совместимость. Ведь, на самом деле, в крови человека обнаружено гораздо больше антигенных свойств, чем в системе АВ0. Просто они у большинства населения слабо проявляются.

Но у пациента с тяжелыми заболеваниями, изменяющими свойства крови и аллергизирующими организм, они становятся определяющими, требуют считаться с наличием и уровнем в крови. Поэтому знание пациентом собственной группы добавляет уверенности в результате исследования.